Nativa, Sinop, v. 11, n. 2, p. 277-282, 2023.
Pesquisas Agrárias e Ambientais
DOI: https://doi.org/10.31413/nativa.v11i2.15346
ISSN: 2318-7670
Nodulação de leguminosas com potencial de uso na recuperação de áreas
degradadas em campo rupestre quartzítico
André César PINHEIRO1, Michele Aparecida Pereira da SILVA1* ,
Paula Alves OLIVEIRA2, Israel Marinho PEREIRA2
1Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, Diamantina, MG, Brasil.
*E-mail: michelesilva04@yahoo.com.br
Submetido em 18/04/2023; Aceito em 26/07/2023; Publicado em 06/09/2023.
RESUMO: Este trabalho teve o objetivo de avaliar a composição e estrutura de espécies leguminosas em
formação vegetal de campo rupestre na Serra do Espinhaço Meridional, assim como verificar a diversidade de
bactérias fixadoras de nitrogênio das espécies nodulíferas. O levantamento florístico foi realizado em uma área
de Reserva Legal da empresa Anglo American no município de Conceição do Mato Dentro, Minas Gerais. A
região está inserida na Borda Leste da Serra do Espinhaço Meridional e apresenta clima Cwa. Instalou-se 25
parcelas fixas (10 × 10 m) para a comunidade arbustivo-arbóreo e 60 parcelas fixas (1 × 2 m) para a comunidade
herbáceo-subarbustivo no levantamento florístico. Foram estimadas a densidade absoluta e relativa, frequência
absoluta e relativa para ambas as comunidades. Após o levantamento florístico prévio, realizou-se a coleta de
40 nódulos da raiz das espécies de Calliandra fasciculata e 23 de Moldenhawera emarginata. Em seguida, realizou-se
o isolamento das bactérias dos nódulos provenientes das espécies C. fasciculata e M. emarginata. Foram avaliadas
as características culturais dos isolados e a partir dos dados, foi possível agrupar os isolados por meio de um
dendrograma cultural com a utilização do coeficiente de Jaccard, pelo software MVSP (Multivariate Stastitical
Package). Três espécies leguminosas foram registradas em ambos as comunidades, totalizando 1.192 indivíduos
distribuídos dentre C. fasciculata (com 1080 ind.), M. emarginata (com 86 ind.) e Periandra mediterranea (com 26
ind.). Contudo, na espécie P. mediterranea não foi constatada nodulação em campo. A espécie C. fasciculata foi
responsável por 92,62% do total de indivíduos. A partir das características morfológicas avaliadas, dos 23
isolados de C. fasciculata, obteve-se 6 grupos culturais. Este resultado sugere alta diversidade morfofisiológica
de bactérias fixadoras de nitrogênio nodulando essa espécie em ambiente de campo rupestre quartzítico. Devido
à importância desta espécie, recomenda-se seu uso em projetos de recuperação, especialmente em ambientes
semelhantes ao deste estudo.
Palavras-chave: endemismo; Fabaceae; nitrogênio; nodulação.
Nodulating legumes with potential for use in the recovery of degraded areas
in quartzite rocky fields
ABSTRACT: The objective of this work was to evaluate the composition and structure of leguminous species
in the vegetal formation of rocky fields in Serra do Espinhaço Meridional, as well as to verify the diversity of
nitrogen-fixing bacteria of the nodular species. The floristic survey was carried out in a reserve area based in
the municipality of Conceição do Mato Dentro, Minas Gerais. The region is located on the eastern edge of the
Serra do Espinhaço Meridional and has a Cwa climate. Twenty-five fixed plots (10 × 10 m) were installed for
the shrub-tree compartment and 60 fixed plots (1 × 2 m) for the herb-subshrub compartment to carry out the
floristic survey. Absolute and relative density, absolute and relative frequency were estimated for both
compartments. After the previous floristic survey, 40 root nodules of the species of Calliandra fasciculata and 23
of Moldenhawera emarginata were collected. Afterward, bacteria were isolated from the nodules of C. fasciculata
and M. emarginata. The cultural characteristics of the isolates were evaluated and from the data, it was possible
to group the isolates through a cultural dendrogram using the Jaccard coefficient, using the MVSP (Multivariate
Statistical Package) software. Three leguminous species were recorded in both compartments, totaling 1192
individuals distributed among C. fasciculata (with 1080 ind.), M. emarginata (with 86 ind.) and Periandra mediterranea
(with 26 ind.). However, for the species P. mediterranea, no nodulation was observed in the field. The species C.
fasciculata was responsible for 92.62% of the total number of individuals. From the morphological characteristics
successfully evaluated, of the 23 isolates of C. fasciculata, 6 cultural groups were obtained. This result suggests
high morphophysiological diversity of nitrogen-fixing bacteria nodulating this species in a quartzite rock field
environment. Due to the importance of this species, its use in recovery projects is recommended, especially in
environments similar to the one in this study.
Keywords: endemism; Fabaceae; nitrogen; nodulation.
Nodulação de leguminosas com potencial de uso na recuperação de áreas degradadas ...
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1. INTRODUÇÃO
Os campos rupestres caracterizam-se por possuir
formações vegetais campestres, principalmente herbáceo-
arbustivas, com presença de afloramentos rochosos e solos
rasos, geralmente em altitudes mais elevadas (em geral acima
de 900 m). Estes ambientes apresentam grande variação
florística determinada pelas condições extremas como alta
incidência de luz, solos pouco profundos marcados por baixa
umidade e pobreza nutricional, exibindo assim alto grau de
endemismo, além de muitas espécies ameaçadas de extinção
(JACOBI; CARMO, 2011).
Esse ecossistema está dentre os mais ameaçados de Minas
Gerais (SALGADO; CARMO, 2015). Ainda, segundo estes
autores, esta realidade pode estar relacionada às atividades de
mineração nessas regiões, que muitas vezes causam vários
impactos e passivos ambientais gerando a necessidade de se
recuperar estas áreas. Segundo Lima et al. (2006), um fator
determinante no insucesso nos programas de recuperação de
áreas degradadas por mineração em campos rupestres é
exatamente o baixo nível de informação sobre esses
ecossistemas.
Informações sobre a ecologia e os critérios de seleção das
espécies a serem utilizadas em projetos de recuperação de
áreas degradadas são importantes (MESSIAS et al., 2012),
considerando que as condições estruturais e químicas em que
se encontram os solos degradados não sejam adequadas a
sobrevivência, ao desenvolvimento e ao estabelecimento de
diversas espécies vegetais. Além disso, o uso de espécies
nativas em projetos de recuperação pode ser considerado
uma das técnicas mais adequadas já que estas espécies
geralmente estão mais adaptadas às condições ambientais
locais, favorecendo a resiliência destas áreas (FELFILI et al.,
2000).
A utilização de espécies da família botânica Fabaceae,
também conhecida como leguminosas, de qualquer hábito, se
torna uma prática eficiente na recuperação de áreas
degradadas já que grande parte são capazes de estabelecer
simbiose com bactérias que fixam biologicamente o
nitrogênio atmosférico. As leguminosas nodulíferas
caracterizam uma relação simbiótica entre estas plantas e
bactérias fixadoras de nitrogênio que ocorre dentro do
nódulo. Existem várias espécies de bactérias que são capazes
de fixar o nitrogênio atmosférico em simbiose com as
leguminosas. Entre os principais gêneros de bactérias
fixadoras de nitrogênio, destacam-se: Rhizobium,
Bradyrhizobium, Sinorhizobium, Mesorhizobium.
A implantação de leguminosas pode ser considerada de
baixo custo e com bons resultados, sendo bastante
recomendada por diversos autores como alternativa de cobrir
a área rapidamente, auxiliando na proteção, conservação do
solo e manutenção da fertilidade por meio da adubação verde
(SILVA, 2022).
Estudos sobre a ocorrência dessas espécies em seus
ambientes nativos, bem como sua associação com
microrganismos, podem subsidiar os projetos de recuperação
de áreas degradadas, principalmente em campos rupestres,
devido às suas características peculiares e aos desafios
enfrentados na recuperação destes ambientes. Dessa forma,
este estudo teve o objetivo de avaliar a composição e
estrutura de espécies leguminosas em formação vegetal de
campo rupestre quartzítico na Borda Leste da Serra do
Espinhaço Meridional, assim como verificar a nodulação e
diversidade morfológica de bactérias fixadoras de nitrogênio
das espécies nodulíferas.
2. MATERIAL E MÉTODOS
2.1. Localização e caracterização da área de estudo
O levantamento florístico foi realizado em uma área de
Reserva Legal da Anglo American no município de
Conceição do Mato Dentro, Minas Gerais, conforme
apresentado na Figura 1. Esta região encontra-se na Borda
Leste da Serra do Espinhaço Meridional e apresenta clima
Cwa segundo classificação de Köppen (SÁ JÚNIOR et al.,
2012), com temperatura e precipitação médias anuais em
torno de 20 ºC e 1.450 mm, respectivamente.
Figura 1. Localização da área de estudo e sua vegetação típica.
Figure 1. Location of the study area and its typical vegetation.
A Reserva Legal (Fazenda Boa Esperança) possui uma
área de 191,46 ha e está localizada entre as coordenadas
659700 m E e 661610 m E de longitude e 7907900 m S e
7906200 m S de latitude – UTM 23K. Possui uma altitude
média de 770 metros e um desnível máximo de 50 metros.
No local, ocorre predomínio da vegetação típica de campo
rupestre quartzítico, com remanescentes de Floresta
Estacional Semidecidual e áreas de pastagem no entorno.
O local de estudo foi selecionado por ser a área de campo
rupestre quartzítico de maior representatividade da
fitofisionomia dentro da reserva. Próximo ao limite inferior
da área de estudo, há uma mata de galeria sobre curso d’água
perene e com solos de maior umidade. Além disso, devido ao
relevo irregular que este local apresenta, forma-se uma linha
de drenagem no centro da área amostral, com solos ainda
mais úmidos em comparação ao entorno. Os solos foram
classificados como sendo ácidos (pH em água de 4,18 a 5,27),
com textura arenosa, sendo classificados como Neossolos
Litólicos Distróficos, de acordo com o Mapa de Solos do
Brasil.
2.2. Estrutura e composição das espécies leguminosas
No levantamento florístico, foi utilizada a amostragem
preferencial, na qual delimitou-se uma área de 50 × 50 m
(0,25 ha) em ambiente de campo rupestre quartzítico
(OLIVEIRA et al., 2017). A amostragem da vegetação
diferenciou-se de acordo com o hábito das plantas, o qual se
baseia na altura e na presença ou não de lenho nas plantas.
Para a comunidade de hábito arbustivo-arbóreo, cinco faixas
contíguas de 10 × 50 m foram alocadas e subdivididas em
Pinheiro et al.
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parcelas fixas de 10 × 10 m, totalizando 25 unidades
amostrais. Na amostragem da comunidade de hábito
herbáceo-subarbustiva, em cada faixa foram instaladas 12
parcelas fixas de 2×1 m aleatoriamente distribuídas,
totalizando 60 unidades (0,012 ha). Todos os indivíduos
pertencentes à família botânica Fabaceae foram registrados
em ambas as comunidades. Os parâmetros fitossociológicos
foram estimados por espécie, sendo densidades absoluta e
relativa, frequências absoluta e relativa, utilizando
metodologia proposta por Mueller-Dombois; Ellenberg
(1974) e adaptada segundo Munhoz; Felfili (2006).
2.3. Diversidade morfológica de bactérias fixadoras de
nitrogênio
Com base no levantamento florístico prévio na área,
identificando as espécies leguminosas nodulíferas, foi
realizada a coleta de nódulos no campo. Coletou-se 40
nódulos de raízes da espécie Calliandra fasciculata Benth e 23
nódulos de Moldenhawera emarginata (Spreng) L. P. Queiroz;
Alkin, nos pontos georeferenciais 660292.930675 m W e
7906862.35907 m S e 660281.254125 m W e 7906865.53432
m S, respectivamente. Ressalta-se que a espécie Periandra
mediterranea (Vell.) Taub. também ocorreu na área de estudo,
no entanto, a partir da investigação de vários indivíduos desta
leguminosa, não foram encontrados nódulos no campo,
mesmo havendo registro de nodulação para essa espécie na
literatura (FARIA et al., 2011).
A coleta dos nódulos ocorreu em novembro, na estação
quente e chuvosa da região. Para a coleta foram retirados do
solo os sistemas radiculares das espécies leguminosas,
utilizando-se um sacho e escavando-se com atenção às raízes
secundárias a partir do tronco até suas ramificações (raízes
finas), local onde geralmente se encontram os nódulos
(MOREIRA; SILVA, 1993). Para tal, evitou-se que os
nódulos se destacassem das raízes. Após coletados, os
nódulos foram armazenados em sacos plásticos e
posteriormente lavados em água corrente com auxílio de uma
peneira. Após isso, foram transferidos e guardados
individualmente em frascos de vidro com tampa rosqueada,
contendo um chumaço de algodão na parte superior e sílica
gel na parte inferior. Manteve-se o armazenamento até a
próxima etapa do trabalho, que consistiu no isolamento das
bactérias dos nódulos.
2.4. Isolamento e caracterização cultural dos isolados
O isolamento das bactérias foi realizado utilizando 40
nódulos provenientes da espécie C. fasciculata e 23 da espécie
M. emarginata. Antes do processo de isolamento, os nódulos
foram lavados e reidratados em água destilada, por uma hora.
Em seguida, foram imersos em álcool etílico 95% por 30
segundos, com o objetivo de quebrar a tensão superficial,
imersos em peróxido de hidrogênio (H2O2) por um minuto
para desinfestar a superfície do nódulo e logo após, lavados
seis vezes com água destilada para a retirada do peróxido de
hidrogênio (H2O2). Após esta etapa, os nódulos foram
macerados em placas contendo meio de cultura 79 (FRED;
WAKSMAN, 1928) e em seguida espalhou-se o material em
forma de estrias compostas a fim de diluir este material e
obter as colônias isoladas. As bactérias foram cultivadas em
estufa sob temperatura de 28ºC.
As seguintes características culturais foram avaliadas:
alteração do pH do meio de cultura após o crescimento da
bactéria (ácido, neutro ou alcalino); taxa de crescimento,
avaliada pelo tempo de formação de colônias isoladas (1 dia,
crescimento muito rápido; 2-3 dias, crescimento rápido; 4-5
dias, crescimento intermediário; 6-10 dias, crescimento lento;
mais de 10 dias, crescimento muito lento); características das
colônias: cor das colônias (creme, branca, amarela ou rosa);
diâmetro das colônias (mm); borda (inteira, irregular ou
lobada); forma (circular, irregular ou puntiforme); elevação
(plana, lenticular, convexa ou pulvinada); detalhes ópticos
(translúcida, transparente, brilhante ou opaca) e consistência
da colônia (seca, aquosa, gomosa, butírica ou viscosa). O
muco produzido pelas células foi avaliado quanto à
quantidade (escasso, pouco, moderado ou abundante)
(MOREIRA, 1991).
Na caracterização dos isolados utilizou-se letras iniciais
referentes ao nome da espécie leguminosa, seguida do
referido número do isolado obtido do respectivo nódulo (ex.
CF21, que corresponde a C. fasciculata, isolado 21). Com os
dados de caracterização morfológica dos isolados, construiu-
se uma matriz binária a fim de agrupá-los através de um
dendrograma cultural pelo método da média aritmética não
ponderada (UPGMA), com a utilização do coeficiente de
Jaccard e o software MVSP (Multivariate Statistical Package)
(KOVACH, 2004).
3. RESULTADOS
3.1. Estrutura e composição das espécies leguminosas
Registrou-se duas espécies representantes da família
Fabaceae na comunidade arbustivo-arbóreo, totalizando
4.664 indivíduos/ha, distribuídos entre as espécies C.
fasciculata (com 4.320 indivíduos/ha), M. emarginata (com 344
indivíduos/ha). Os valores de densidade absoluta e relativa e
frequência absoluta e relativa para a comunidade arbustivo-
arbórea são apresentados na Tabela 1.
Tabela 1. Densidades absoluta e relativa e frequências absoluta e
relativa das espécies leguminosas da comunidade arbustivo-arbórea,
no levantamento realizado na fazenda “Boa Esperança”, município
de Conceição do Mato Dentro, MG.
Table 1. Absolute and relative densities and absolute and relative
frequencies of the leguminous species of the shrub-tree community,
in the survey carried out at the “Boa Esperança” farm, in the
municipality of Conceição do Mato Dentro, MG.
Espécie
DA DR FA FR
Calliandra fasciculata Benth
4.320 92,62
100,0
65,79
Moldenhawera emarginata Spreng.
344 7,38 52,0 34,21
Total
4.664 100 152 100
em que: DA = Densidade Absoluta (número de indivíduos/ha); DR =
Densidade Relativa; FA = Frequência Absoluta (número de ocorrências das
espécies por unidade de amostra) e FR = Frequência Relativa.
3.2. Isolamento, caracterização cultural e diversidade de
bactérias
Vale ressaltar que a etapa de caracterização cultural foi
realizada somente para C. fasciculata, já que para M. emarginata
não se obteve um número suficiente de isolados (apenas dois)
a fim de montar um dendrograma de similaridade. As
características morfofisiológicas estão apresentadas na Figura
2. A maioria dos isolados acidificou (faixa de pH entre 6,0 e
6,8 o meio de cultura (82,06%) e a percentagem daqueles que
neutralizaram o meio foi de 17,39%, sendo que para esta
característica nenhum isolado alcalinizou o meio de cultura
(Figura 2). A produção de pouco muco foi observada para
56,5% dos isolados e abundante para 43,47%, com
consistência gomosa para 73,91% deles.
Nodulação de leguminosas com potencial de uso na recuperação de áreas degradadas ...
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Figura 2. Colônias isoladas fenotipicamente diferentes em função
coloração e da mudança de pH. Figura A: meio de cultura. Figura B:
pH neutro para ambos os isolados. Figura C: pH ácido para ambos
os isolados. Figura D: pH neutro do lado esquerdo neutro e do lado
direito ácido.
Figure 2. Phenotypically different isolated colonies as a function of
color and pH change. Figure A: culture medium. Figure B: Neutral
pH for both isolates. Figure C: Acidic pH for both isolates. Figure
D: Neutral pH on the neutral left side and acidic on the right side.
As cromogêneses creme e branca das colônias foram
verificadas para 78,26% e 21,73% dos isolados,
respectivamente. Predominaram isolados com forma
puntiforme e circular para 56,52% e 43,47 respectivamente e
absorção de indicador negativa para todos os isolados. Como
a taxa de crescimento foi rápida (2-3 dias) para 100% dos
isolados e nenhum isolado alcalinizou o meio de cultura.
Esses resultados sugerem que gêneros como Bradyrhizobium,
que alcalinizam o meio de cultura e com taxa de crescimento
lenta, não estaria nodulando a espécie em questão. O gênero
Azorhizobium poderia então ser descartado para esta espécie
pelo fato de também não alcalinizar o meio de cultivo.
A partir das características morfológicas avaliadas dos 23
isolados de C. fasciculata, foram obtidos seis grupos culturais
por meio do agrupamento realizado pelo dendrograma
cultural analisado a 80% de similaridade (Figura 3).
Figura 3. Dendrograma de similaridade construído com utilização
do coeficiente de Jaccard e algoritmo UPGMA, baseado em
características fenotípicas culturais de bactérias isoladas de C.
fasciculata com grupos formados a 80% de similaridade.
Figure 3. Similarity dendrogram constructed using the Jaccard
coefficient and UPGMA algorithm, based on cultural phenotypic
characteristics of bacteria isolated from C. fasciculata with groups
formed at 80% similarity.
O grupo A apresentou o maior número de isolados em
relação aos outros (6), seguido dos grupos C e D que
apresentaram 5 e 5 isolados, respectivamente. Os grupos B e
E apresentaram menor número de isolados (2). Este
agrupamento revelou grande diversidade de isolados
proveniente desta espécie na condição da fitofisionomia
campo rupestre quartzítico. Esta diversidade encontrada no
trabalho estaria restrita a gêneros condizentes às
características culturais de Rhizobium, Sinorhizobium,
Mezorhizobium e Allorhizobium. Certamente, um experimento
futuro de autenticação para confirmar a nodulação e a
identificação molecular deve ser realizado para comprovar os
resultados encontrados.
4. DISCUSSÃO
A espécie C. fasciculata possui hábito arbustivo, ocorre
geralmente em afloramentos rochosos, em bordas rochosas
de cursos d’água, campos rupestres e é endêmica das regiões
mais elevadas do centro e norte de Minas Gerais
(BARNEBY; GRIMES, 1998). A alta densidade e frequência
desta espécie indicam que ela possui alta adaptação às
condições da reserva. Além disso, a área onde mais ocorre
está localizada próxima à um curso d’água, corroborando o
que foi descrito por estes autores. Com base em dados de
herbários virtuais (Reflora e speciesLink) e consultas à
literatura, nota-se o predomínio desta espécie na região onde
foi realizado o estudo.
A floração e a frutificação desta espécie ocorrem de
janeiro a maio e de agosto a novembro, respectivamente
(BORGES, 2013). Esta característica pode ser considerada
vantajosa em projetos de recuperação, já que em boa parte
do ano essa planta atrai polinizadores e dispersores de seus
propágulos na área (BORGES, 2010). Outra característica
interessante e desejada, encontrada em outra espécie deste
mesmo gênero (Calliandra linearis Benth.) é a presença de
rizomas. Tal característica permite sua reprodução assexuada,
ocupação de ambientes mais amplos e heterogêneos, além de
formar uma rede que confere maior resistência a estas
plantas, entre outros. Contudo, necessita-se de estudos o
potencial de reprodução assexuada na espécie C. fasciculata.
A espécie M. emarginata é uma leguminosa pertencente ao
grupo Caesalpinioideae, possui hábito arbustivo-arbóreo,
dependendo do local de ocorrência (características do solo,
principalmente) e é endêmica da região norte de Minas
Gerais, ocorrendo geralmente em formações de campo
rupestre (QUEIROZ, 1997).
Na comunidade herbáceo-subarbustiva registrou-se
apenas uma espécie de leguminosa (Periandra mediterrânea)
estimando-se 2.167 indivíduos/ha e frequência absoluta de
18,33%. Apesar do grande número de representantes na área,
não foram encontrados nódulos em campo para esta espécie,
nesta ocasião. Contudo, há relatos (FARIA et al., 2011) sobre
a obtenção de nódulos em campo desta mesma espécie em
áreas de vegetação de canga (savana metalófita) na região de
Carajás (estado do Pará).
As características culturais são o passo primordial para
identificar novos micro-organismos e auxiliar nos estudos de
diversidade. No entanto, não geram informações sobre as
relações evolutivas entre os organismos, portanto, técnicas
moleculares são necessárias para suprir essa deficiência dos
métodos tradicionais. Apesar disso, por meio dessas
características, os gêneros de Rhizobium descritos até o
momento podem ser diferenciados em meio de cultura 79
AB
DC
Pinheiro et al.
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281
(FRED; WAKSMAN, 1928; MOREIRA; SIQUEIRA, 2006)
como constatado por Guimarães et al., 2012 que identificou
bactérias de crescimento lento alcalinizando o meio de
cultura e identificadas como Bradrhizobium spp., com 100%
de similaridade pelo sequenciamento do 16S rRNA. A
avaliação das características culturais é uma ferramenta
simples e barata, porém, durante todo o processo de
avaliação das colônias deve-se manter um rigor quanto aos
padrões comparativos de estirpes já descritas (MARTINS et
al., 1997).
5. CONCLUSÕES
Neste estudo, foram identificadas duas espécies de
leguminosas nodulíferas em uma formação vegetal de campo
rupestre quartzítico na Borda Leste da Serra do Espinhaço
Meridional. Os resultados obtidos revelaram uma notável
diversidade morfológica das bactérias fixadoras de nitrogênio
que nodulam a leguminosa C. fasciculata nessa área específica.
Além disso, a espécie C. fasciculata exibiu características
altamente promissoras para o uso em programas de
recuperação de áreas similares às estudadas. Essas
características desejáveis sugerem que essa leguminosa pode
desempenhar um papel crucial na melhoria da qualidade do
solo e na restauração da vegetação em ecossistemas de campo
rupestre quartzítico.
Essas descobertas fornecem informações valiosas para
futuros esforços de restauração e conservação desses
ambientes frágeis, destacando a relevância da simbiose entre
leguminosas nodulíferas e bactérias fixadoras de nitrogênio
para a sustentabilidade ecológica da região. Considerando as
características benéficas observadas na espécie C. fasciculata,
sua incorporação em projetos de restauração pode
potencialmente contribuir para a preservação e regeneração
desses ecossistemas únicos.
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SILVA, M. A. P. S. Restauração ecológica. São Paulo:
Editora Senac São Paulo, 2022. 128p. (Série Universitária)
Agradecimentos: À empresa Anglo American Minério de Ferro
Brasil os nossos agradecimentos por todo apoio logístico e
financeiro durante a condução do trabalho.
Contribuição dos autores: A.C. P. - conceituação, metodologia,
coleta de dados, redação e revisão; M.A.P.S - pesquisa, redação,
coleta de dados, revisão e formatação; P.A.O. - metodologia, coleta
de dados, análise estatística, pesquisa, redação; I. M. P –
conceituação, redação, revisão e validação. Todos os autores leram
e concordaram com a versão publicada do manuscrito.
Revisão por comitê institucional: Não se aplica.
Comitê de Ética: Não se aplica.
Disponibilização de dados: Contribuição dos autores: Os
dados da pesquisa serão disponibilizados mediante solicitação
através do e-mail da autora correspondente.
Conflito de Interesse: Os autores declaram que não existem
conflitos de interesse com outros pesquisadores ou instituições.